Резюме
Здесь мы предположили, что аутологичные Aдипоза-Dполучено Rгенеративная C(ADRCs) - это новая возможность для пациентов, страдающих пигментным ретинитом. В отличие от лекарств с единым механизмом действия, ADRCs регулируют многочисленные факторы способствующие потере пациентом зрения.

Фон16
В 1857 году доктор Дондерс выделил группу неизлечимых заболеваний глаз, которые он назвал пигментным ретинитом (ПР). Но все оказалось не так просто: Впоследствии исследователи обнаружили более 100 генов, в которых могут происходить мутации, приводящие к развитию пигментного ретинита. Но генетические аномалии не все проясняют: в половине случаев РП отсутствует семейный анамнез и объяснения.

И все же, несмотря на сложность заболевания, ученые смогли составить схему дегенеративного процесса РП. Ретинит означает воспаление сетчатки. Это воспаление приводит к дегенерации сетчатки и зрительного нерва по спирали.

Процесс ремонта ADRC
При наличии инфекции, травмы или заболевания ADRCs направляются к местам воспаления и запускают процесс восстановления с помощью различных механизмов действия.

Время для нового варианта
Разработчики лекарств и генных терапий продолжают придерживаться неудачной модели "одна молекула или ген для одной болезни" для лечения РП. Этот минималистский подход не позволил создать лекарство или генную терапию, которая изменила бы прогрессирование заболевания или улучшила бы остроту зрения пациентов с наилучшей коррекцией (BCVA).

В реальном мире 100 000 человек в США с диагнозом РП не имеют возможности замедлить, стабилизировать или обратить вспять прогрессирование болезни. Вместо этого большинство из них слепнут к 40 годам. Поэтому пациентам необходим новый стандарт лечения, независимо от генной мутации или другой причины, вызывающей РП.

Гипотеза
Здесь мы предположили, что аутологичные Aдипоза-Dполучено Rгенеративная C(ADRCs) - это новая возможность для пациентов, страдающих пигментным ретинитом. В отличие от лекарств с единым механизмом действия, ADRCs регулируют многочисленные факторы способствующие потере пациентом зрения.

Краеугольным камнем нашей гипотезы является то, что все системы организма взаимосвязаны и зависимы. Таким образом, дисфункция нескольких систем способствует развитию дегенеративных заболеваний, включая РП ^{[1] [2] [3] [4] [5]}

В частности, мультисистемная дисрегуляция, связанная с РП, приводит к:

1. Окислительный стресс,
2. Снижение уровня оксида азота,
3. Повышенное системное воспаление,
4. Аномальный иммунный ответ,
5. Метаболическая дисрегуляция,
6. Дисфункция эндотелия и
7. Нарушение работы митохондрий и
8. Вегетативная дисфункция.^{[6] [7] [8] [9]}

Эти нарушения приводят к апоптозу фоторецепторов сетчатки и слепоте. ^[10]

Обоснование протокола IV
Мы предлагаем IV доставку ADRC на основе:

1. Исследование на крысах, имитирующее РП у человека, показало, что внутривенная инфузия превосходит субретинальное введение. “Похоже, что при системном введении стволовые клетки оказывают свое действие на всю сетчатку. Для сравнения, субретинальное введение клеток, в том числе клеток, полученных из костного мозга, обычно приводит к восстановлению палочек и колбочек". (S. Wang 2010) ^[11]
2. Исследование МСК пуповины (UCMSCs) на человеке подтвердило целесообразность, безопасность и пользу системной доставки стволовых клеток. "У большинства пациентов острота зрения с лучшей коррекцией (BCVA) улучшилась в течение первых трех месяцев. Доля пациентов с улучшенной или сохраненной BCVA составила 96,9%, 95,3%, 93,8%, 95,4%, 90,6% и 90,6% на 1, 2, 3, 6, 9 и 12-м месяце наблюдения соответственно. Большинство пациентов (81,3%) сохранили или улучшили остроту зрения в течение 12 месяцев." (T. Zhao 2020). Исследователи также предположили, что разрушение гемато-ретинального барьера (ГРБ) при прогрессировании РП делает возможным проникновение клеток в поврежденную ткань сетчатки без необходимости инъекций непосредственно в глаз. ^{[12] [13] [14]}
3. Исследование внутривенного введения USMSC по сравнению с прямым введением стероида показало: "Внутривенная инфузия UCMSC показывает медленное, но стойкое действие в облегчении МЭ (макулярного отека) и может улучшить зрительные функции на более длительное время"..^[15]
4. Японская группа исследователей сравнила трофические факторы, выделяемые свежими ADRCs, с культивированными ASCs (МСК, полученными из жировой ткани) от одного и того же человека. Исследование показало, что ADRCs являются более многофункциональными и мощными, чем культивированные клетки ASCs. ADRC выделяют большее количество цитокинов и растворимых белков в значительно больших количествах, чем ASCs. ^[16]
   Отмеченное выше благоприятное сравнение распространяется и на МСК, полученные из других источников, таких как костный мозг, пуповина и плацента.
5. И наоборот, в нескольких исследованиях, посвященных прямой инъекции, сообщалось о таких нежелательных явлениях, как разрывы сетчатки и фиброз. Таким образом, и профиль безопасности, и способы внутривенной инфузии имеют свои преимущества.

Протокол AMBROSE по заболеваниям сетчатки глаза:

1. Сертифицированный пластический хирург, используя липосакцию с применением воды (WAL), собирает 400 кубиков липоаспирата. WAL малотравматична для пациента и тканей, что обеспечивает более высокий выход и жизнеспособность АЦЦП.
2. Система Celution высвобождает ADRCs из липоаспирата.
3. Медсестра ставит капельницу и вводит маннитол. Маннитол - это сахарный спирт, который временно нарушает работу БРБ. Это стандартный способ доставки лекарств в заднюю стенку глаза.
4. Препараты ADRC вводятся внутривенно в виде 20-минутной инфузии.

Амбулаторная процедура занимает около пяти часов. Из этого времени подготовка клеток занимает 2,5 часа, в течение которых пациент спокойно отдыхает.

ADRCs
Aдипоза-Dполучено Rгенеративная C(ADRCs) - это обозначение препарата стромальной сосудистой фракции (СВФ) клинического класса. Неотъемлемая роль ADRCs - поддержание клеточного, тканевого и системного гомеостаза.^{[17] [18] [19]}

ADRCs - это гетерогенная популяция клеток, включающая мезенхимальные стволовые клетки, другие прогениторные клетки, фибробласты, Т-регуляторные клетки и макрофаги. В их составе высок процент эндотелиальных клеток, эндотелиальных прогениторных клеток, макрофагов и лейкоцитов.

После обнаружения воспалительного сигнала ADRC-секретома выделяет сотни цитокинов и факторов роста в больное микроокружение. Эндогенные клетки посылают сигналы обратно в ADRC.

Это перекрестное взаимодействие дает команду отдельным типам клеток, необходимым для восстановления, активизироваться, а тем, кто не нужен (или вреден), - отступить. Иными словами, множество биологических агентов в секретоме восстанавливает клеточную стабильность и гомеостаз.

Центры помощи пожилым людям - чудо-растение для восстановления нервов
Miracle-Gro снабжает почву вашего сада питательными веществами, необходимыми для роста здоровых корней, стеблей, лепестков и листьев. Точно так же, как мы удобряем растение, которому не хватает жизненно важных питательных веществ, ADRC выделяют факторы роста, необходимые для здоровья нашего стареющего мозга, сердца, мышц, нервов и так далее. ^[20]

Одной из таких групп факторов роста является "Нейротрофические факторы (НТФ).” Нейро относящиеся к нервам и трофический, от древнегреческого trophikósозначает "пища или питание". Другими словами, НТФ питают нейроны и нервы питательными веществами.

В частности, нейротрофический фактор роста мозга (BDNF) стимулирует образование новых нейронов, связей между нервными клетками и нервами. Он также восстанавливает миелиновую оболочку, окружающую нервы. Кроме того, эта замечательная молекула обладает противовоспалительным и антиапоптотическим действием. Снижение уровня BDNF коррелирует с прогрессированием РП. ^{[21] [22] [23] [24] [25]}

Примечательно недавнее открытие нейроиммунных клеток в ADRCs. Нейроиммунные клетки иннервируют ткани и выделяют BDNF.^[26] Кроме того, другие цитокины в жировой ткани выделяют огромное количество нейрогенеративных факторов.

 Исследования на людях показали, что ADRC выделяют факторы, которые:

• Снижение регуляции маркеров воспаления и аутоиммунных заболеваний, включая TNF-A и TH17, но не ограничиваясь ими,
• Снижение выработки эндотелина-1, известного констриктора кровеносных сосудов и виновника заболевания у некоторых пациентов с РП.
• Включают плацентарный фактор роста (PGF), стромальный фактор-1 (SDF-1) и фактор роста эндотелия сосудов (VEGF), которые способствуют росту и стабилизации новых кровеносных сосудов. Эти ГФ также обладают противовоспалительным и антиапоптотическим действием.
• Способствуют переходу от воспалительных макрофагов (M1s) к противовоспалительным макрофагам (M2s), например, простагландин E2 (PGE2).

Проницаемость кровяного ретинального барьера
Врачей и пациентов, страдающих глазными заболеваниями, очень волнует вопрос о том, можно ли доставить взрослые стволовые клетки неинвазивным способом и безопасно проникать через гемато-ретинальный барьер (B-R-B), являющийся продолжением гемато-мозгового барьера. КРБ защищает наш мозг, глаза и спинномозговой канал от микробов. Это версия Форт-Нокса для нашей центральной нервной системы. Однако вместо гранитной бетонной конструкции эпителиальные и эндотелиальные клетки выстилают внешний и внутренний гемато-ретинальный барьер соответственно. ^[27]

Три механизма обеспечивают миграцию МСК и секретома ADRC в заднюю стенку глаза.

1. Маннитол, безопасный сахарный спирт, временно открывает B-B-B.
2. ADRC выделяют цитокины, которые проникают через B-B-B,
3. МСК обладают способностью пересекать границу Б-Б-Б. ^{[28] [29]}

Поскольку лимфатические сосуды расположены параллельно сосудистой системе, они май Это может быть путь, по которому стволовые клетки мигрируют из селезенки в обход гематоэнцефалического барьера. ^[30]

Возраст и центры помощи пожилым людям
Хотя старение - это сбой в работе стволовых клеток, ADRCs в подкожной жировой клетчатке остаются доступными, многочисленными и мощными на протяжении всей жизни. (J. Willerson et al. Buying New Soul 2013) ^[31] Таким образом, аутологичные ADRC эффективны у пожилых пациентов.

Безопасность
Система Celution System® - это закрытая стерильная лаборатория в коробке. Celution высвобождает аутологичные ADRC клинического класса из липоаспирата в точке оказания медицинской помощи.

Более 40 стран одобрили Celution для клинического применения, включая Великобританию, Европейский союз, Японию, Южную Корею и Новую Зеландию. Кроме того, FDA одобрило Celution для проведения девяти клинических исследований.

С момента одобрения Celution в Европе и Японии в 2007 году в ходе испытаний, исследований и клинического применения не было зарегистрировано ни одного побочного явления, связанного с клетками. ^[32]

[1] Данцер Р. Нейроиммунные взаимодействия: От мозга к иммунной системе и наоборот. Физиол Рев. 2018;98(1):477-504.

[2] Трейси К Воспалительный рефлекс Nature Vol 420 19/26 December 2002

[3] Blaszkiewicz et al. Участие нейроиммунных клеток в иннервации жировой ткани Mol Med (2020) 26:126

[4] Simora N et al. The Role of Immune System in Metabolic Health and Disease Cell Metabolism 25, March 7, 2017

[5] Amiya E MD PHD et al The Relationship between Vascular Function and Autonomic Nervous System Ann Vasc Dis Vol. 7, No. 2; 2014; pp 109-119 Online Month May 16, 2014

[6] Okita A, Murakami Y, Shimokawa S, et al. Изменения воспалительных молекул в сыворотке крови и их связь со зрительными функциями при пигментном ретините. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2020;61(11):30.

[7] Виник А. И. Дирижер вегетативного оркестра Июнь2012 Том3 Статья71 13

[8] Limoli P G et al. Антиоксидантные и биологические свойства мезенхимальных клеток, используемых для терапии пигментного ретинита Антиоксиданты 2020, 9, 983

[9] Соррентино ФС, Бонифацци С, Паоло П Роль системы эндотелина в сосудистой дисрегуляции, связанной с пигментным ретинитом Журнал Офтальмологии Том 2015, Article ID 405234

[10] Murakami, Y et al, (2018), С-реактивный белок и прогрессирование потери зрения при пигментном ретините. Acta Ophthalmol, 96: e174-e179.

[11] Ванг С, Лу Б, Гирман С, Дуань Ж, Макфарланд Т, и др. (2010) Неинвазивная терапия стволовыми клетками в крысиной модели дегенерации сетчатки и сосудистой патологии. PLoS ONE 5(2): e9200.

[12] Zhao T et al. Внутривенная инфузия мезенхимальных стволовых клеток пуповины поддерживает и частично улучшает зрительные функции у пациентов с прогрессирующим пигментным ретинитом STEM CELLS AND DEVELOPMENT Volume 29, Number 16, 2020

[13] Грант З.Л. и др. Блокирование эндотелиального апоптоза реваскуляризирует сетчатку в модели ишемической ретинопатии J Clin Invest. 2020;130(8):4235-4251

[14] Lang M et al. Сосудистая дисфункция при пигментном ретините Acta Ophthalmol. 2019: 97: 660-664

[15] Zhao T, Lie H, Wang F, Liu Y, Meng X, Yin Z и Li S (2021) Сравнительное исследование модифицированной субтеноновой капсульной инъекции триамцинолона ацетонида и внутривенной инфузии мезенхимальных стволовых клеток пуповины при пигментном ретините в сочетании с макулярным отеком. Фронт. Pharmacol. 12:694225.

[16] Hirose Y et al. Сравнение трофических факторов, секретируемых из человеческой жировой стромальной сосудистой фракции и из жировых стромальных/стволовых клеток у тех же людей Цитотерапия, 2018; 20: 589-591

[17] С. Кестен и Дж. К. Фрейзер Аутологичные регенеративные клетки, полученные из жировой ткани: Платформа для терапевтического применения Advanced Wound Healing Surgical Technology International XXIX

[18] Visoso F. J. et al Mesenchymal Stem Cells in Homeostasis and Systemic Diseases: Hypothesis, Evidences, and Therapeutic Opportunities Int. J. Mol. Sci. 2019, 20, 3738

[19] Каплан А. И. Мезенхимальные стволовые клетки: Время изменить название! СТВОЛОВЫЕ КЛЕТКИ TRANSLATIONALMEDICINE 2017; 6:1445-1451

[20] A Caplan PhD МСК: Страж и защитники от травмы J. Cell. Physiol. 231: 1413-1416, 2016.

[21] Разави, Шахназ и др. "Нейротрофические факторы и их влияние на лечение рассеянного склероза". Передовые биомедицинские исследования 4 (2015): 53. PMC. Web. 28 Sept. 2018.

[22] J. K. Huang et al Регенерация миелина при рассеянном склерозе: Targeting. Эндогенные стволовые клетки, Американское общество экспериментальной нейротерапии, 2011 г.

[23] T Lopatina et al. (2011) Стволовые клетки, полученные из жировой ткани, стимулируют регенерацию периферических нервов: BDNF, секретируемый этими клетками, способствует заживлению нервов и росту аксонов De Novo. PLoS ONE 6(3): e178991

[24] S. Seigo et al, Некультивированные регенеративные клетки, полученные из жировой ткани, способствуют регенерации периферических нервов, Journal of Orthopaedic Science, Volume 18, Issue 1, 2013, Pages 145-151

[25] Xu et al Нейротрофический фактор, полученный из мозга, уменьшает воспаление и апоптоз гиппокампа при экспериментальном менингите, вызванном Streptococcus pneumoniae, Journal of Neuroinflammation (2017) 14:156

[26] Блашкевич, М., Вуд, Э., Койзар, С. и др.. Участие нейроиммунных клеток в иннервации жировой ткани. Mol Med 26, 126 (2020)

[27] Campbell M, Humphries P. The blood-retina barrier: tight junctions and barrier modulation. Adv Exp Med Biol. 2012; 763:70-84.

[28] L. Liu et al От крови к мозгу: Могут ли системно трансплантированные мезенхимальные стволовые клетки пересекать гематоэнцефалический барьер? Stem Cells International Volume 2013, Article ID 435093

[29] A. Laroni et al Мезенхимальные стволовые клетки для лечения неврологических заболеваний: Иммунорегуляция и нейропротекция Immunology Letters 168 (2015) 183-190

[30] M. Absthina et al В менинге человека и нечеловеческих приматов находятся лимфатические сосуды, которые можно визуализировать неинвазивно с помощью МРТ eLife 2017;6: e 29738

[31] Perin EC и Willerson JT Покупка новой души J Am Coll Cardiol. 2012;60(21):2250-2251